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    四甲基氫氧化銨,2-吡咯烷酮,三異丙醇胺85%

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    【多聚甲醛】它是良好的固定液

        多聚甲醛是多種組織細胞是良好的固定液,對脂類及酶類的保存均優于其他固定劑,丙i酮對保存多糖類及蛋白質也有較好的效果,而且多聚甲醛的自發熒光非常弱,對實驗結果沒有影響,是做免i疫熒光比較好的固定劑。

     多聚甲醛是不會影響熒光表達的觀察的,但是在進行多聚甲醛固定時以及隨后的免i疫熒光染色時一定要注意避光,同時在選擇熒光染料時注意激發光波長與發射光波長不要與綠色熒光蛋白的太近就可以了。多聚甲醛現貨

     







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    “聚甲醛配置”多一分不多,少一分不少

    我們應該如何配置多聚甲醛.在放置磁力攪拌棒的容器中,將4克多聚甲醛(EM級)溶解于100ml PBS,加入數滴NaOH,在通風廚中60℃加熱(打開瓶蓋)使溶解,冷卻至室溫,調整PH值為7.4,使用前新鮮配制.  常用的固定劑種類很多,固定劑的正確選擇取決于被研究抗原的性質及所用抗i體的特性.固定劑可分為兩類:有機的溶劑和交聯劑.有機的溶劑如乙醇和丙i酮能夠去處脂類物質使細胞脫水,把蛋白質沉淀在細胞結構上.交聯劑如多聚甲醛一般通過自由氨基基團把生物分子橋連起來,形成一個相互交聯的抗原網.多聚甲醛配置的方法可能多種多樣,因為每個公司都有自己的配置方法。

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    從組織學的觀點來說,甲醛是一種良好的固定劑,它有很多的優點: 組織收縮較少,損傷少,保存固有物質好;固定均勻,穿透力強;能使組織硬化,增進組織彈性,有利于切片;能保存脂肪及脂類物質;成本較低。雖然甲醛有上述的優點,但這都是相對而言,任何物質都不可能十全十美的,它也有許多缺點: 雜質含量較多,如甲醇,可鈍化酶類,影響反應;含有微量甲酸,導致固定液酸變,影響染色;可產生福爾馬i林色素,影響觀察;不能固定尿酸和糖類物質;容易揮發,污染環境,可導致標本干涸;可長期存在于固定過的組織上。有人做過實驗,組織用甲醛固定后在流水中沖洗5小時后,仍留有相當多的甲醛與蛋白質相結合,但需要經過長時間的流水沖洗(24天的沖洗)方能除去.可見存在于組織上的甲醛是不可能除去的.因為臨床活檢不可能有這么長的時間來沖洗組織.因此要特別指出的是,在其后的各種技術操作中,要特別注意到甲醛的存在,必須要想辦法除去它,否則將會給各種染色造成影響,甚至導致失敗。多聚甲醛現貨

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